【脉铂医药】MedBio|Cap Cy5 Firefly Luciferase mRNA (5-moUTP)|MED18751|技术资料

1、mRNA基本资料：

Messenger RNA (mRNA）——信使核糖核酸携带遗传信息，在蛋白质合成时充当模板的RNA。信使RNA 从脱氧核糖核酸（DNA）转录合成的带有遗传信息的一类单链核糖核酸（RNA）。它在核糖体上作为蛋白质合成的模板，决定肽链的氨基酸排列顺序。mRNA存在于原核生物和真核生物的细胞质及真核细胞的某些细胞器（如线粒体和叶绿体）中。RNA病毒和RNA噬菌体中的 RNA既是遗传信息的载体又具有mRNA的功能。生物体mRNA种类的多少与生物进化水平有关，高等生物所含的遗传信息多，mRNA的种类也多。生物体内某种mRNA的含量根据需要而有不同，如5龄蚕后部丝腺体的主要任务是快速合成大量丝心蛋白，因而编码丝心蛋白的mRNA含量特别多。有些细菌需要不断适应外部环境，其体内编码某些诱导酶的mRNA的含量也较多。

2、mRNA优势：

（1）插入性突变的风险最小

可以转染非分裂细胞等较难转染的细胞

（2）短期表达且可控

可以精准瞬时地对表达进行调控，并且可以通过生理代谢途径完全讲解。

（3）高效的递送

mRNA针对的是细胞质，只需要穿过质膜即可。相比之下，质粒DNA和大多数类型的病毒载体必须到达细胞核，并穿过格外的膜屏障。

（4）快速的表达水平

转染后6-8小时即可检测到对应的表达，比DNA或者病毒基质的方法更快

3、mRNA转染的优点：

（1） 无需核吸收——蛋白直接在细胞质中表达

（2）其蛋白质表达比DNA转染更快

（3）以完全不依赖启动子的方式表达蛋白质

（4）没有基因组整合的风险

（5）非常适合转染生长缓慢或不分裂的细胞

（6）蛋白表达与mRNA的量直接相关

（7）瞬时转染：蛋白质的表达在有限的时间内持续，避免了与积累有关的毒性

4、Cap Cy5 Firefly Luciferase mRNA (5-moUTP)基本资料及用途：

EZ Cap™ Cy5萤火虫荧光素酶mRNA（5-moUTP）一旦进入细胞后将表达萤火虫荧光素酶蛋白，它最初从萤火虫Photinus pyralis中提取。该酶ATP依赖性地催化D-荧光素氧化，在约560nm波长下产生化学发光。萤火虫荧光素酶是一种常用的生物发光报告基因，常用于基因调控和功能研究。它适用于mRNA运送，翻译效率，细胞活力和体内成像等实验。

EZ Cap™ Cy5萤火虫荧光素酶mRNA（5-moUTP）以1mg / ml的浓度提供。它使用EZ Cap TM Reagent AG（3'OMe）以共转录的方式加帽，以较高效率获得具有Cap 1结构的mRNA。相比于Cap 0结构（ARCA和mCap加帽），带有Cap 1结构的mRNA对于哺乳动物系统更适合，并且具有更高的转录效率。 EZ Cap™ Reagent AG（3'OMe）获得仅以正确方向插入的能力，导致形成mRNA相较于使用EZ Cap™Reagent AG的mRNA具有两倍的翻译效率。添加5-moUTP（5-Methoxy-UTP）和poly（A）尾可抑制RNA介导的先天免疫激活，并在体外和体内增强mRNA的稳定性和寿命。 Poly（A）尾在提高翻译起始效率方面也起着重要作用。 Cy5是合成的红色荧光染料，其最大激发和发射波长分别为650nm和670nm。当转录时，Cy5-UTP和5-moUTP以1：3的比例使用。以该比例使用可以使mRNA易于可视化并且仍然可以在细胞培养物中翻译。一般，翻译效率和Cy5-UTP替代之间存在反相关。

 产品的所有修饰都旨在模拟完全加工成熟的mRNA。 EZ Cap™ Cy5萤火虫荧光素酶mRNA（5-moUTP）是观察mRNA运送，定位，翻译和其他行为的理想产品。