【脉铂医药】MedBio|Firefly Luciferase mRNA (ARCA, 5-moUTP)|MED18753|技术资料

2021-12-08

1、mRNA基本资料:

Messenger RNA (mRNA)——信使核糖核酸携带遗传信息,在蛋白质合成时充当模板的RNA。信使RNA 从脱氧核糖核酸(DNA)转录合成的带有遗传信息的一类单链核糖核酸(RNA)。它在核糖体上作为蛋白质合成的模板,决定肽链的氨基酸排列顺序。mRNA存在于原核生物和真核生物的细胞质及真核细胞的某些细胞器(如线粒体和叶绿体)中。RNA病毒和RNA噬菌体中的 RNA既是遗传信息的载体又具有mRNA的功能。生物体mRNA种类的多少与生物进化水平有关,高等生物所含的遗传信息多,mRNA的种类也多。生物体内某种mRNA的含量根据需要而有不同,如5龄蚕后部丝腺体的主要任务是快速合成大量丝心蛋白,因而编码丝心蛋白的mRNA含量特别多。有些细菌需要不断适应外部环境,其体内编码某些诱导酶的mRNA的含量也较多。

2、mRNA优势:

(1)插入性突变的风险最小

可以转染非分裂细胞等较难转染的细胞

(2)短期表达且可控

可以精准瞬时地对表达进行调控,并且可以通过生理代谢途径完全讲解。

(3)高效的递送

mRNA针对的是细胞质,只需要穿过质膜即可。相比之下,质粒DNA和大多数类型的病毒载体必须到达细胞核,并穿过格外的膜屏障。

(4)快速的表达水平

转染后6-8小时即可检测到对应的表达,比DNA或者病毒基质的方法更快

3、mRNA转染的优点:

(1) 无需核吸收——蛋白直接在细胞质中表达

(2)其蛋白质表达比DNA转染更快

(3)以完全不依赖启动子的方式表达蛋白质

(4)没有基因组整合的风险

(5)非常适合转染生长缓慢或不分裂的细胞

(6)蛋白表达与mRNA的量直接相关

(7)瞬时转染:蛋白质的表达在有限的时间内持续,避免了与积累有关的毒性

4、 Firefly Luciferase mRNA (ARCA, 5-moUTP)基本资料及用途:

萤火虫荧光素酶mRNA(ARCA,5-moUTP)表达的萤光素酶蛋白,最初是从萤火虫Photinus pyralis中提取的。 该酶催化ATP依赖性D-荧光素氧化以产生氧化荧光素,氧化荧光素是一种单重激发的化合物,当返回其基态时发光。萤火虫荧光素酶是一种常用的生物发光报告基因,用于基因调控和功能研究。它适用于基因表达,细胞活性和体内成像等分析。

我们的萤火虫荧光素酶mRNA的浓度为1mg / ml,它是ARCA加帽的,polyA加尾并且与修饰的核苷酸结合。ARCA(抗反转帽类似物)的加帽确保了高翻译效力;Poly(A)尾部在提高翻译起始效率方面起着重要作用;而添加5-moUTP和poly(A)尾可抑制RNA介导的先天免疫激活,并在体外和体内增强mRNA的稳定性和寿命。

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