Cy3-UTP 抑制剂 BMPO Leukotriene D4 荧光染料 DMAPP 定制合成
ARCA EGFP mRNA (5mCTP, ψUTP)基本资料:
用ARCA, 5mCTP(7-methyl-CTP), ψUTP (pseudo-UTP)修饰的增强型绿色荧光蛋白mRNA, 抑制RNA介导的先天免疫激活,具有稳定高效的表达效率,可作为实验,ARCA EGFP mRNA是一种报告(reporter)mRNA,可以用作对照,通过各种基于荧光的方法研究哺乳动物细胞中的转染和表达。
将Firefly Luciferase mRNA (ARCA, 5mCTP, ψUTP)转染到细胞后,细胞可表达萤火虫萤光素酶(luciferase)蛋白,该蛋白最初是从萤火虫Photinus pyralis中分离出来的。
萤火虫萤光素酶是一种常用的生物发光(bioluminescence)报告分子,常用于基因调控、细胞活力测定、ATP水平分析和体内成像等研究。萤光素酶的发光不同于荧光,不需要激发光,但需要底物。萤光素酶在ATP和氧存在的条件下,催化底物发生氧化反应,在560 nm处产生化学发光。该产品已经是5’端加帽,3’端加poly(A)尾和经过5mCTP/ψUTP 修饰的mRNA,可以模拟真核生物中加工成熟的mRNA。使用ARCA以共转录的方式对mRNA进行加帽,形成了Cap 0结构,增加了mRNA的稳定性和翻译效率。修饰核苷酸5mCTP和ψUTP的添加可以减少先天免疫刺激,增加mRNA的稳定性。Poly(A)尾的添加使mRNA更加稳定并提高mRNA的翻译起始效率。mRNA转染的优点:· 无需核吸收——蛋白直接在细胞质中表达· 其蛋白质表达比DNA转染更快· 以完全不依赖启动子的方式表达蛋白质· 没有基因组整合的风险· 非常适合转染生长缓慢或不分裂的细胞· 蛋白表达与mRNA的量直接相关· 瞬时转染:蛋白质的表达在有限的时间内持续,避免了与积累有关的毒性
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